吸烟与食管鳞状细胞癌p53基因突变关系的meta分析
吴晓聪 洪晓涛 郭琦玫 郑霭萱
广东省揭阳市人民医院肿瘤内科，广东揭阳 522000
食管癌主要包括食管腺癌和食管鳞状细胞癌（esophageal squamous cell carcinoma，ESCC）。吸烟是引起多个脏器（包括口腔/鼻腔、食管、肺、胰腺等）癌变的常见发病原因[1]，关于在ESCC中烟草摄入与p53基因突变的关系，国内外学者进行了研究，但结论不一致。2004年的一项meta分析发现吸烟和食管癌p53基因改变存在密切关系[2]。但2015年另一篇meta分析，发现烟草摄入与ESCC p53基因突变无明显相关关系[3]。所以，有必要继续进行完善的中外文献检索，以获取相关数据，对ESCC患者中吸烟因素与p53基因突变进行meta分析，从而进一步明确吸烟与p53突变之间的关系。
1.1 文献检索
由两位作者独立检索Medline、Embase、CNKI、万方、维普5个数据库，检索截止日期：2022年1月5日，检索关键词如下：ESCC、p53突变、吸烟、Oesophageal squamous cell carcinoma、p53 mutation、Smoking。
1.2 文献纳入及排除标准
①研究对象为经组织病理学确诊的ESCC患者；
②提供既往吸烟史相关信息，其中重度吸烟者定义为日均烟草吸入20支及以上或者吸烟指数≥400，轻度定吸烟者定义为日均烟草吸入在1～20支或者吸烟指数＜400；
③提供吸烟组和非吸烟组p53基因突变或者p53蛋白过表达的数量；
④当相同或重叠的数据出现在多个出版物，首选最新发表的或者纳入数据最多的研究。排除标准：①所需数据不全；
②文献全文无法获得或者原始数据无法提取。
1.3 原始数据的提取和文献质量评分
由两位作者各自详阅符合纳入与排标准的研究，从文中提取原始数据，最后进行数据比对，数据不一致时，复阅文献，修正数据直至双方结果一致。研究的质量评价方法采用纽卡斯尔-渥太华量表（the Newcastle-Ottawa scale，NOS）量表，NOS量表评价低于4星的文献不纳入本meta分析。
1.4 meta分析方法
采用Stata 12.0统计学软件进行数据分析，采用合并比值比（odds ratio，OR）和95%可信区间（95%confidence interval，95%CI）评估 ESCC 患者中吸烟与p53突变之间的关联强度，各项纳入研究之间的异质性检测采用I2检验进行，当I2＜ 50%，P＞ 0.1，异质性不显著，选择固定效应模型计算。反之，异质性显著，选择随机效应模型计算，并利用敏感性分析检验结果的稳健和可靠性。发表偏倚的检验则采用Begg检验和Egger漏斗图，P＜ 0.05为差异有统计学意义。
2.1 数据库检索
初检索1547篇文献，第一步，去重；
第二步，阅读题目和摘要，根据纳入及排除标准初筛1498篇，剩余的49项研究阅读全篇，其中有27篇研究纳入本研究[4-30]（图1、表1），共纳入2257例ESCC患者，其中吸烟人群占68.59%，不吸烟人群占31.41%。27项研究NOS评分均不低于4星，为中高质量文献，可以纳入分析。
表1 纳入研究基本情况
图1 文献筛选流程图
2.2 meta分析结果
将纳入的27篇文献进行异质性检验，P=0.001，I2=52.4%，异质性显著，选择随机效应模型并进行敏感性分析，测得合并OR=1.64（95%CI：1.17～ 2.30，P=0.004），差异有统计学意义（图 2），对其中 6 项提供轻度吸烟数据的研究[9，12，15，19，22，29]进行异质性检验，P=0.845，I2=0.0%，选择固定效应模型，轻度吸烟与p53基因突变的OR=1.12（95%CI：0.67～ 1.88，P=0.67）（图 3A），对其中 6项提供重度吸烟数据的研究[8，12-13，15，22，29]进行异质性检验，P=0.724，I2=0.0%，选择固定效应模型，重度吸烟与p53基因突变的OR=2.28（95%CI：1.38～ 3.78，P=0.001）（图 3B）。
图2 随机效应下的meta分析结果
图3 轻度吸烟组meta分析结果（A）与重度吸烟组meta分析结果（B）
2.3 敏感性分析结果
逐个剔除各篇文献后，OR值及95%CI仍保持一致，提示采用随机效应模型的结果是稳健可靠的。见图4。
图4 敏感分析结果
2.4 发表偏倚
使用Begg检验及Egger检测，P值分别为0.78和0.643（图5），提示无明显发表偏倚。
图5 Begg图结果
本研究结果显示，吸烟与ESCC p53基因突变存在正相关关系，吸烟指数越高，p53基因突变风险越高。p53抑癌基因是ESCC中最常发生突变的基因，参与DNA损伤修复、细胞周期调控、诱导细胞凋亡等[31]。吸烟是ESCC发生的主要危险因素之一，已有部分研究证实香烟中的苯并芘代谢物与食管癌的发生发展密切相关，其中可能涉及p53基因碱基颠换[32]。本研究发现在ESCC患者中，吸烟与p53突变存在正相关性，但各研究间存在中度异质性，根据部分文献将人群分为轻度吸烟组和重度吸烟组两组，然后再进行荟萃分析，结果显示重度吸烟与p53突变存在明显正相关关系，而轻度吸烟与p53突变不存在正相关性，该亚组分析结果与既往研究结论相似的[3]，提示随着吸烟频率增加和吸烟时间的延长，p53突变的风险也明显升高。
本研究仍存在如下不足，首先，仅纳入中英文文献，可能造成发表性偏倚；
其次，纳入的各项研究之间存在着异质性，可能原因如下：①各研究纳入人群吸烟指数不一致；
②未能提取其他合并高危因素的数据进行亚组分析，如饮酒；
③不同研究间采用不同的检测方法和检测试剂对p53突变进行检测。